Resumen Con el objetivo de determinar la prevalencia de mastitis subclínica mediante el conteo de células somáticas, el aislamiento de Staphylococcus spp. y los factores de riesgo asociados a la ordeña manual y mecanizada en cabras de Comondú, Baja California Sur, México, se evaluaron 12 granjas. Se tomaron 234 muestras de leche de 117 cabras, 90 con ordeña mecanizada y 144 con ordeña manual. La prevalencia de mastitis subclínica fue del 52% (IC del 95%: 44%-60%), siendo de 86% (IC del 95%: 78%-94%) en la ordeña manual y de 33% (IC del 95%: 19%-47%) en la mecanizada. Los grupos de patógenos más prevalentes fueron Staphylococcus coagulasa negativos (SCN) y Staphylococcus aureus. Las probabilidades de mastitis aumentan en cabras con ordeña manual, con falta de higiene en corrales y en las hembras mayores de cinco años (OR: 33.30).

Abstract In order to determine the prevalence of subclinical mastitis, pathogens that cause it, and risk factors in manual and mechanical milking of goats in Comondú, Baja California Sur, Mexico, 12 farms were evaluated. A total of 234 milk samples were taken from 117 goats, 90 from mechanized milking and 144 from manual milking. The prevalence of subclinical mastitis was 52% (95% CI: 44%-60%), being 86% (95% CI: 78%-94%) in manual milking and 33% (95% CI: 19%-47%) in mechanized milking. The most prevalent groups of pathogens were coagulase negative Staphylococcus and Staphylococcus aureus. The chances of mastitis increase in goats milked manually, those with poor hygiene in pens, and those older than five years (OR: 33.30).

Abstract Goat production in Mexico is concentrated in poorer areas in arid and semi-arid areas of the country’s north and center, particularly in the Mixtec region of Oaxaca, Guerrero and Puebla. Because goats can survive in near desert conditions their production of milk and animals is a valuable nutritional contribution to human diets in these areas. Disease in goats in Mexico has generally received scant attention, however researchers at the INIFAP have studied this species and its pathologies. This review focuses on the main diseases affecting goats in Mexico and the research in this area by the INIFAP. In most of the goat herds studied in Mexico reproductive disorders are often caused by diseases such as brucellosis, leptospirosis and chlamydia, all considered to be endemic and potentially zoonotic. Respiratory and gastrointestinal disorders are the main ailments in kids. High frequencies of arthritic encephalitis, a disease caused by infection with small ruminant lentiviruses, and paratuberculosis and caseous lymphadenitis, both bacterial in origin, have been documented in productive-age goats throughout Mexico. All three are chronic, causing producers to mistakenly assume they have no major impact on productivity. Q fever, a known zoonotic, is currently considered exotic in Mexico, but in other countries is frequently associated with reproductive disorders, abortions and occasional respiratory problems in goats. The INIFAP has addressed all the above diseases. It was instrumental in diagnosing and controlling brucellosis, the principal bacterial zoonosis in Mexico. Researchers at INIFAP have also helped to determine that diseases previously considered exotic in Mexico have become endemic, and then developing the tools needed for their diagnosis. The INIFAP has made vital contributions to understanding the national disease panorama in goats and transferring diagnostic and treatment technologies to livestock laboratories nationwide.

Resumen La importancia de las cabras en México radica en que su producción se concentra en zonas áridas y semiáridas del norte y el centro del país, y particularmente en la región de la Mixteca en los estados de Oaxaca, Guerrero y Puebla, donde prevalece la pobreza y donde la especie, es capaz de sobrevivir y producir leche y cabritos. El estudio de las enfermedades de las cabras en México es escaso; el INIFAP se ha caracterizado por nunca haber dejado de lado la investigación en esta especie. En esta revisión, se abordan las principales enfermedades que afectan a las cabras en México y se describen las investigaciones que sobre ellas ha desarrollado el INIFAP. Los problemas de salud que enfrentan la mayoría de los rebaños caprinos en los que se ha realizado investigación, demuestran que algunos trastornos reproductivos son causados por enfermedades como brucelosis, leptospirosis y clamidiasis, todas éstas consideradas endémicas y con potencial zoonótico. Por otra parte, los problemas de tipo respiratorio y digestivo son los principales padecimientos que afectan a los cabritos. En las cabras en etapa productiva del territorio nacional, se ha demostrado una frecuencia elevada de animales con artritis encefalitis, enfermedad causada por la infección de Lentivirus de los pequeños rumiantes, paratuberculosis y linfadenitis caseosa, estas últimas de origen bacteriano; una particularidad de estas tres enfermedades es su característica de cronicidad, lo que hace pensar de manera equívoca al productor que su presencia no tiene mayor impacto dentro de los rebaños. Finalmente, se ha logrado detectar la presencia de la fiebre Q, una enfermedad zoonotica actualmente considerada exótica en México, y que en otros países es frecuentemente asociada con trastornos reproductivos, abortos y ocasionalmente, problemas respiratorios en los animales. En las aportaciones del INIFAP hay que destacar el diagnóstico y el control de la brucelosis, que es la principal zoonosis bacteriana en nuestro país; además de haber contribuido a que enfermedades consideradas exóticas en México, se determine que ya son endémicas, y se cuente con las herramientas para su diagnóstico, siendo un reto para nuestro instituto realizar la transferencia de estas tecnologías a los laboratorios de diagnóstico de nuestro país.

Abstract This study aimed to evaluate the individual and flock serological frequency and detect the risk factors of C. abortus infection in seven Mexican sheep producing states. It was performed a multifactor, cross-sectional, and stratified study with an analysis of 5,321 serological samples from 323 flocks in 61 municipalities. Serology frequency was determined using a commercial ELISA kit. The risk factors associated with the disease were determined through surveys and statistical analyses with a squared Chi test and a 95% confidence interval. Of the 5,231 serum samples, 581 (10.92 %) had positive ELISA test results. The results, by state, of positive sera were: Tlaxcala 13.08 % (73/558); Sonora 12.45 % (102/819); Chihuahua 11.56 % (107/925); Hidalgo 11.34 % (97/855); Chiapas 10.15 % (60/591); Querétaro 9.69 % (79/815); Estado de México 7.09 % (63/758). The frequency of seropositive herds was 43.34 % (140/323). The results, when grouped by state, were the following: Hidalgo 67.39 % (31/46), Querétaro 67.18 % (43/64); Sonora 40.92 % (19/47); Tlaxcala 33.33 % (12/36); Chiapas 31.57 % (12/38); Estado de México 25.45 % (14/55), and Chihuahua 24.32 % (9/37). The main risk factors that favor the presence of ovine enzootic abortion are gestation, 37 to 48 mo of age, and an intensive production system. These serology studies identified the presence of ovine enzootic abortion in Mexico and some of the risk factors associated with this infection.

Resumen El objetivo fue evaluar la frecuencia serológica individual y de rebaño, así como detectar los factores de riesgo de C. abortus, en siete estados donde se realiza la producción ovina en México. Se efectuó un estudio multifactorial, transversal y estratificado, con análisis de 5,321 muestras serológicas en 323 rebaños de 61 municipios. Se realizó ELISA con un kit comercial. Los factores de riesgo asociados con la enfermedad se determinaron mediante cuestionarios y análisis estadísticos con una prueba de Ji cuadrada con un intervalo de confianza del 95%. Del total de 5, 231 muestras de suero que fueron colectadas, 581 (10.92 %) dieron positivas a la prueba de ELISA. Los resultados por estado de sueros positivos fueron: Tlaxcala 13.08% (73/558); Sonora 12.45 % (102/819); Chihuahua 11.56 % (107/925); Hidalgo 11.34 % (97/855); Chiapas 10.15 % (60/591); Querétaro 9.69 % (79/815); Estado de México 7.09 % (63/758). La frecuencia de hatos seropositivos, fue de 43.34 % (140/323). Los resultados al ser agrupados por estado fueron los siguientes: Hidalgo 67.39 % (31/46), Querétaro 67.18 % (43/64); Sonora 40.92 % (19/47); Tlaxcala 33.33 % (12/36); Chiapas 31.57 % (12/38); Estado de México 25.45 % (14/55) y Chihuahua 24.32 % (9/37). Los principales factores de riesgo que favorecen la presencia del aborto enzoótico de las ovejas, fueron que estuviesen gestantes, que tuviesen una edad entre los 37 a los 48 meses y que el sistema de producción fuese intensivo. Estos estudios serológicos identificaron la presencia del aborto enzoótico de las ovejas en México, así como algunos de los factores de riesgo que inciden para favorecer su presencia.

Abstract Caseous lymphadenitis of small ruminants causes economic losses worldwide. To date, no effective vaccine has been developed against the causative agent of this disease, Corynebacterium pseudotuberculosis. The objective of the present work was to evaluate an aroA mutant gene strain of C. pseudotuberculosis in cellular and murine models, for attenuation and the ability to stimulate an immune response. The intracellular survival of the aroA mutant strain and the wild type strain (WT) of C. pseudotuberculosis was evaluated in J774A.1 murine macrophages using a multiplicity of infection (MOI) of 1:1 with the following infection times: 30 min, and 1, 2, 4, 8, 12, and 24 h. The largest difference in the intracellular survival of the mutant was observed 30 min post-infection. After subcutaneous skin vaccination, the subcutaneous lesion progression observed on the 14th day was more severe in those animals that were vaccinated with the WT strain. An analysis of the residual virulence in the murine model did not reveal any bacteria in mice vaccinated with the aroA strain on day 28 post-vaccination. Mice vaccinated with the mutant showed 50 % protection against the intraperitoneal challenge, exceeding that of the control group (41.67 %). We conclude that the virulence of the aroA mutant was significantly attenuated in both cellular and murine models according to the residual virulence detected in mice. However, vaccination with the mutant failed to confer at least 80 % protection, which is desirable for an immunogen. Hence, this study contributes to the knowledge of the immune response against Corynebacterium pseudotuberculosis.

Abstract: Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of Johne’s disease. The mechanisms by which MAP is able to adapt to the innate host response are still unclear. We examined Ferroportin 1 (FPN1) mRNA expression levels via real-time PCR of the mouse macrophage cell line J774 that was incubated in the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) or MAP crude protein extract. Infection with live MAP decreased FPN1 mRNA levels in a multiplicity of infection (MOI)-dependent fashion. Macrophages infected with MOIs of 20:1 and 15:1 did not show any change in FPN1 gene expression, whereas MOIs of 10:1 and 5:1 induced a decrease of 50 and 80%, respectively. Macrophages treated with 50, 100, 150 and 200 µg/mL of MAP crude extract (ATCC19698) decreased FPN1 mRNA expression by 25%. Additionally, up-regulation of FPN1 mRNA by an iron overload treatment of 400 µM of ferric nitrilotriacetate (FeNTA) was abrogated by live MAP (MOI 20:1) by approximately 70%. Our data revealed an inhibitory effect of MAP on FPN1 mRNA and suggested a bacterial mechanism that may play a role in host iron regulation.

Resumen: El Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) es el agente causal de la enfermedad de Johne. Los mecanismos por los cuales MAP es capaz de adaptarse a la respuesta natural del huésped aún no están claros. A través de la PCR en tiempo real, se examinaron los niveles de expresión del ARN de la ferroportina 1 (FPN1) en células de macrófagos de ratón J774 infectados con Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis o con el extracto crudo de proteína (ECP) de MAP. La multiplicidad de infección (MOI) con MAP dependió de la disminución de los niveles del ARNm de la FPN1. Los macrófagos infectados con las MOI de 20:1 y 15:1 no mostraron cambio alguno en la expresión del gen FPN1, mientras que en las MOI de 10:1 y 5:1, disminuyó en un 50% y 80%, respectivamente. En los macrófagos tratados con 50, 100, 150 y 200 μg/mL de ECP de MAP (ATCC19698), la expresión del ARNm de FPN1 disminuyó 25%. La sobreexpresión del ARNm de FPN1 en macrófagos J774 tratados con una sobrecarga de hierro de 400 μM de nitrilotriacetato férrico (FeNTA) se suprimió cerca de un 70% por la infección con MAP viva (MOI 20:1). Estos datos revelaron que MAP inhibe la expresión del ARNm de FPN1, lo que sugiere que existe un mecanismo bacteriano que participa en la regulación del hierro del huésped.

Brucella abortus S19 is an intracellular vaccine strain against bovine brucellosis. Rabies is a lethal disease in cattle. Plasmids encoding the G glycoprotein from the rabies virus induce a protective immune response in different animal species. A vector called pBBR4-CMV-Ggp-SV40+, which encodes the G gene, regulated by the cytomegalovirus eukaryotic expression promoter, and which can be used to transform the B. abortus S19 vaccine strain, was constructed. The stability of the transformant strain was tested both in vitro and in vivo. In the in vitro assays, B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ was grown for 5 sequential passages, and for the in vivo assays, female BALB/c mice were infected. Colony-forming unit counting and plasmid identification were performed in each passage and in the spleens at 7 days post-infection. To test the plasmid stability in the strain, all parameters were determined with and without antibiotic. The bacterial concentration was lower with antibiotic than without it, but the bacterial growth was more homogeneous. The plasmid was identified in antibiotic- and non-antibiotic-treated isolated colonies under both in vitro and in vivo conditions. The plasmid construct was also transfected into BHK-21 cells, which express the G glycoprotein. The B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ strain showed stability, representing a suitable candidate vector for developing a bivalent vaccine against brucellosis and rabies. This is the first time that a Brucella species has been transformed with a eukaryotic expression plasmid.

Brucella abortus S19 es una cepa vacunal intracelular contra la brucelosis bovina. La rabia es una enfermedad letal en el ganado. Plásmidos codificantes de la glicoproteína G del virus de la rabia inducen una respuesta protectora en diferentes especies animales. En este trabajo se construyó el vector pB-BR4-CMV-Ggp-SV40+, para transformar la cepa vacunal B. abortus S19 y que codifica el gen G regulado por el promotor de citomegalovirus para la expresión eucariótica. Se evaluó la estabilidad de la cepa transformante tanto in vitro como in vivo. Para los ensayos in vitro, la cepa B. abortus SI9 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ se hizo crecer durante cinco pasajes secuenciales y para los ensayos in vivo se infectaron ratones BALB/c hembras. Se determinaron las unidades formadoras de colonia y se identificó el plásmido en cada uno de los pasajes, así como en los bazos a los siete días post infección. Para probar la estabilidad del plásmido en la cepa, todos las variables se midieron con y sin antibiótico. La concentración bacteriana fue más baja con antibiótico que sin él, pero el crecimiento de la bacteria fue más homogéneo. El plásmido se identificó en colonias aisladas en medios con y sin antibiótico tanto en condiciones in vitro como in vivo. Las células BHK-21 se transfectaron con el plásmido construido y expresaron la glicoproteína G. La cepa B. abortus S19 pBBR4-CMV-Ggp-SV40+ mostró estabilidad y representa un candidato adecuado como vector para desarrollar una vacuna bivalente contra brucelosis y rabia. Esta es la primera vez que se transforma una especie de Brucella con un plásmido de expresión eucariota.

Although Chlamydia abortus is classified as an exotic agent in Mexico, there is increasing evidence of its presence. The objective of this study was to isolate C. abortus in dairy goat herds with problems of abortion in the state of Guanajuato, Mexico, and to develop appropriate diagnostic methods for its detection. Serological samples and vaginal swabs were taken from 6 dairy goat herds. The ELISA revealed a seropositivity of 9.60% for C. abortus. The PCR test based on the vaginal mucus samples resulted in 30 of 126 positive animals (23.8%). Chlamydia spp. were isolated in 34 of the 126 animals tested (26.98%). The 3 diagnostic methods tested were valuable and complementary in zones where Chlamydia is suspected to cause abortions. We demonstrated that the bacteria are present in dairy goat herds of Mexico; thus, Veterinary Sanitary Authorities should consider this disease endemic to establish sanitary procedures to control the spread of the disease and to prevent human transmission.

Chlamydia abortus se clasifica como un agente exótico en México; sin embargo, existe cada vez más evidencia de su presencia en los rebaños caprinos. El objetivo de este estudio fue aislar a C. abortus en cabras lecheras de rebaños con problemas de abortos en el estado de Guanajuato, México, y desarrollar pruebas diagnósticas adecuadas para su detección. Se tomaron muestras de suero e hisopos vaginales de seis rebaños caprinos. La prueba ELISA mostró 9.60% de animales seropositivos a C. abortus. El PCR a partir del ADN de moco vaginal dio como resultado 30 animales positivos de 126 (23.8%). Se aisló Chlamydia spp. en 34 de 126 animales muestreados (26.98%). Los tres métodos diagnósticos probados resultaron complementarios y de gran valor ya que se pueden aplicar en las zonas donde se sospecha que Chlamydia está causando abortos. En el trabajo se demostró que este patógeno está presente en los rebaños lecheros de México, por lo que las autoridades sanitarias veterinarias deberían considerar la clamidiosis como endémica, con la finalidad de establecer los procedimientos sanitarios apropiados para evitar que la enfermedad se propague y evitar también el contagio a los humanos.

The virulence of 12 Listeria monocytogenes strains from goat and goat by-products was evaluated. Variable virulence levels were found when compared the relative virulence (mortality, %) and the ability to grow infect the spleen of BALB/c mice inoculated intravenously or intragastrically. Two strains from feed produced 100 % mortality, by either inoculation route and seven strains, including those from feed, infected the spleen with both inoculation routes. A strain inoculated intravenously without causing death in the mice produced spleen counts similar to those obtained in dead mice, this could indicate that a high count of the microorganism in the spleen not necessarily ensures its virulence. We also tested the capacity to infect J774 macrophages and Caco-2 epithelial cells, finding higher invasion and intracellular growth in Caco-2 with respect the macrophages and showing quadratic growth kinetics in both cell lines. Only the two feed strains did not show a significant difference from the control strain (P>0.05) regarding kinetic parameters and invasion percentage in both cell lines. Although all isolates were able to invade Caco-2 cells, not all isolates were able to invade the spleen after the intragastrically inoculation. Two goats feed strains were the most virulent, representing a risk for animal and human health.

Se evaluó la virulencia de cepas de Listeria monocytogenes todas de serotipo 4b procedentes de cabras y sus derivados. Se observaron niveles de virulencia variables cuando se comparó la virulencia relativa (porcentaje de letalidad) en ratones BALB/c inoculados vía intravenosa o intragástrica y su capacidad para infectar macrófagos J774A.1, y células epiteliales Caco-2. Dos cepas obtenidas de alimento de cabras produjeron 100 % de letalidad por ambas vías de inoculación y no mostraron diferencia significativa con la cepa testigo (P>0.05) respecto al porcentaje de invasión y a los parámetros de la cinética de crecimiento cuadrática observada en ambas líneas celulares. Si bien todas las cepas lograron invadir las células Caco-2, solamente algunas consiguieron invadir el bazo después de la inoculación por vía intragástrica. Las dos cepas provenientes de alimento de cabras fueron las más virulentas, representando un riesgo para la salud humana y animal, ya que pueden ser diseminadas en el hato y de este a otras explotaciones o a las instalaciones donde se elaboran alimentos.

The objective of this study was to standardize and develop an ELISA with protoplasmatic antigen from a Mycobacterium avium paratuberculosis (Map) 3065 strain obtained from sheep, to be used for the diagnosis of bovine paratuberculosis. The antigen was set on plates at 10, 5, 2.5 and 1.25 μg/100 μl concentrations and 1:20, 1:40, 1:80 and 1:160 dilutions of positive and negative control sera were tested. The cutoff point was established with a confidence interval of 95% and two standard deviations. Four-hundred and ninety-one bovine sera were used to establish sensitivity and specificity of the ELISA; likewise feces samples were collected for bacteriological isolation and the nested polymerase chain reaction test (PCR) was applied for Map detection. Results of the three tests were analyzed by kappa test to determine association or concordance. Antigen and sera concentration that gave the best difference between controls was 1.25 μg/100 μl antigen and 1:160 serum dilution, cutoff point was established at an optic density of 0.196; obtained sensitivity was 79.31 %, while specificity was 82.25 % and concordance index of the ELISA was 0.2763 as compared to the culture. Results obtained by ELISA with protoplasmatic antigen of the Map 3065 strain make the recommendation of this assay appropriate as an alternative for the diagnosis of bovine paratuberculosis.

Los objetivos del trabajo fueron estandarizar y desarrollar un ELISA con antígeno protoplasmático obtenido de una cepa de Mycobacterium avium paratuberculosis (Map) 3065 de origen ovino, para el diagnóstico de paratuberculosis en bovinos. El antígeno se fijó en las placas a concentraciones de 10, 5, 2.5 y 1.25 μg/100 μl y se probaron diluciones de los sueros control positivo y negativo de 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160. El punto de corte se estableció con un intervalo de confianza del 95 % y dos desviaciones estándar. Para determinar la sensibilidad y especificidad del ELISA se trabajó con 491 sueros de bovinos, así como también, se colectaron muestras de heces para efectuar el aislamiento bacteriológico, y la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada para la detección de Map. Los resultados de las tres pruebas fueron analizadas para determinar la asociación o concordancia por medio de una prueba de Kappa La concentración de antígeno y suero que dieron mejor diferencia entre los controles fue de 1.25 μg/100 μl antígeno y la dilución del suero 1:160, el punto de corte se estableció a una densidad óptica de 0.196; la sensibilidad que se obtuvo fue 79.31 %, la especificidad 82.25 % y el índice de concordancia de 0.2763 del ELISA con respecto al cultivo. Los resultados obtenidos permiten recomendar el ELISA con antígeno protoplasmático de la cepa de Map 3065, como una alternativa para el diagnóstico de la paratuberculosis en bovinos.

The objectives of this study were to determine the effect of risk factors on the occurrence of abortion and their impact on select reproductive efficiency parameters in dairy herds in Aguascalientes, Mexico. Three hundred and fifty three (353) serum samples from aborted or non-aborted cows in 23 dairies with records were collected. Herd/animal information was collected through interviews. In addition to herd condition-related factors, the influence of positive serology to bovine infectious rhinotracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), neosporosis (Nc), and brucellosis (Br) was explored. ELISA tests were used for all diseases, with the exception of Br. Serology of the latter was analyzed using the Bengal pink, rivanol, and radial immunodiffusion tests. Results were subjected to chi2 analysis and significantly-different (P<0.10) variables were subjected to logistic regression analysis. Reproductive efficiency-related variables were evaluated using analysis of variance. Negative IBR serology was the only factor increasing the risk of abortion (odds ratio, OR=1.71). Abortion resulted in increased number of services per conception (3.09 ± 0.25 vs 2.36 ± 0.12, P<0.05), days open (149.8 ± 9.7 vs 262.3 ± 18.7, P<0.01), and average number of days in lactation (192.4 ± 9.1 vs 285.9 ± 19.2, P<0.01). Results were not enough to associate herd/ animal abortion risk factors, but there is no doubt that abortion has a detrimental effect on herd reproductive efficiency.

Los objetivos del estudio fueron determinar el efecto de factores de riesgo sobre la ocurrencia del aborto, y su impacto sobre algunas medidas de eficiencia reproductiva en hatos de Aguascalientes. Se obtuvieron 353 sueros de vacas que abortaron y que no abortaron de 23 hatos con registros. La información de los hatos y animales se obtuvo por entrevistas. Además de factores relacionados con las condiciones de los hatos, se exploró la influencia de la seropositividad a rinotraqueitis infecciosa, diarrea viral bovina, neosporosis y brucelosis, determinada por pruebas comerciales de ELISA, y la última mediante las pruebas de rosa de bengala, rivanol e inmunodifusión radial. Se realizaron análisis de Ji-cuadrada, y posteriormente con las variables significativas (P<0.10) se realizaron análisis de de regresión logística. Las variables relativas a la eficiencia reproductiva de los animales se evaluaron mediante análisis de varianza. La seronegatividad a rinotraqueitis infecciosa fue el único factor que incrementó el riesgo de aborto (RM = 1.71). El aborto incrementó el número de servicios por concepción (3.09 ± 0.25 vs 2.36 + 0.12, P<0.05), los días abiertos (149.8 ± 9.7 vs 262.3 ± 18.7, P<0.01) y el promedio de días en lactancia (192.4 ± 9.1 vs 285.9 ± 19.2, P<0.01). Con los resultados encontrados no se logró determinar asociación entre los factores de riesgo relativos al hato e individuales relacionados con el aborto, pero es indudable que ocasiona un efecto detrimental sobre la eficiencia reproductiva de los hatos.

Paratuberculosis is a chronic granulomatous enteritis caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map), which affects wild and domestic ruminants. Map is shed in feces from infected animals. Transmission of the infection takes place by oral ingestion of the bacterium from contaminated food and water with feces. With the objective to establish a paratuberculosis diagnosis in ovine by nested-PCR from fecal samples, 204 fecal and serum ovine samples were studied. Feces were evaluated by nested-PCR and bacterial culture, serum samples were analyzed by agar gel immunodiffusion (AGID). Nested-PCR yielded a 210 bp amplification product that corresponds to Map-IS900, in 61 out of 204 samples. From these, 43 were from AGID positive animals and 18 from negative animals. Seventeen Map strains were isolated by bacterial culture and AGID detected 91 positive animals. Nested-PCR allowed to detect, sooner, greater number of animals shedding bacillus, even when they had resulted negative to the serological test. This result is considered important because generally these animals, while remaining in the farm, constitute the main source of infection for the herd. Nested-PCR should be considered as an alternative, when a prompt result is required to know the health status of the herd with respect to paratuberculosis.

La paratuberculosis es una enteritis granulomatosa de curso crónico ocasionada por Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (Map), afecta a rumiantes domésticos y silvestres. Map es excretada en las heces de animales que desarrollan la enfermedad, y la transmisión de la infección se da mediante la ingestión de alimentos y agua contaminados por heces de animales infectados. Con el objetivo de establecer el diagnóstico de paratuberculosis en ovinos por medio de la PCR-anidada a partir de muestras de heces, se trabajaron 204 muestras de heces y sueros de ovinos; las heces se evaluaron por PCR-anidada y cultivo bacteriológico, las muestras de sueros fueron analizadas por medio de inmunodifusión en agar gel (lDGA). Con la PCR-anidada se obtuvo un producto de amplificación 210 pb que corresponde a la IS900 de Map, en 61 de las 204 muestras. De éstas, 43 eran de animales positivos a IDGA y 18 negativos. Mediante cultivo bacteriológico se aislaron 17 cepas de Map; en este contexto, la IDGA detectó a 91 animales como positivos. La PCR-anidada permitió detectar en menor tiempo a mayor cantidad de animales que estaban eliminando al bacilo, aun cuando habían resultado negativos a la prueba serológica; este resultado se considera importante, ya que generalmente estos animales, al permanecer dentro de la granja, constituyen la principal fuente de infección para el rebaño. Se debe considerar a la PCR-anidada como alternativa, cuando se requiera el diagnóstico en breve tiempo, para conocer el estado sanitario del rebaño con respecto a paratuberculosis.

OBJECTIVE: To assess the presence of Yersinia enterocolitica in otherwise healthy pigs slaughtered for human consumption. METHODS: One hundred pharyngeal tonsils were sampled in a slaughterhouse in the state of Mexico. The minimum sample size (n=100) was calculated based on a preliminary sample of 20 cases, which had 20% positive cases. The collected tonsil samples were inoculated in Rappaport broth, and Salmonella-Shigella and McConkey media. The biotyping identification process was based on biochemical and serological tests using O:3, O:8 and O:9 antisera. RESULTS: Twenty-two isolates were obtained. Most were biotype 1 (8 cases of O:3 and 8 cases of O:9), but 6 cases could not be serotyped. None of the isolates were of O:8 group. CONCLUSIONS: This was the first time that Y. enterocolitica serotypes were isolated from pig tonsils in Mexico. Its importance rely on the fact that the isolated serotypes are the most commonly found in public health problems.

OBJETIVO: Conocer la existencia de Yersinia enterocolitica en suínos visiblemente sanos y sacrificados para el consumo humano. MÉTODOS: Fueron estudiadas 100 muestras de tejido linfático obtenidas en el momento del sacrifício, en un matadero del Estado de México. Fueron realizados muestreos pilotos de 20 casos, de los cuales 20% fueron positivos, permitiendo obtener una muestra estudiada (n=100). Las muestras colectadas de tejido linfático fueron acondicionadas para el aislamiento de Yersinia enterocolitica en caldo de Rappaport y en medio de cultivo de Salmonella-Shigella y MacConkey. Las identificaciones fueron efectuadas por medio de pruebas bioquímicas y serológicas, utilizándose en el caso los antisueros O:3, O:8 y O:9 para la biotipificación correspondiente. RESULTADOS: Fueron obtenidos 22 aislamientos tipificándose 8 serotipos pertenecientes al O:3 y 8 al O:9 correspondientes al biotipo 1; y, en 6 muestras no fue posible la serotipificación. No se encontró en el total de los aislados el serotipo O:8. CONCLUSIONES: En base en la metodología, se registró la presencia de Y. enterocolitica y sus serogrupos en tejido linfático de porcinos por la primera vez en México; esto es importante porque el patógeno y sus serotipos aislados están comprometidos con mayor frecuencia con problemas de salud pública.

OBJECTIVE: To assess the presence of Yersinia enterocolitica in otherwise healthy pigs slaughtered for human consumption. METHODS: One hundred pharyngeal tonsils were sampled in a slaughterhouse in the state of Mexico. The minimum sample size (n=100) was calculated based on a preliminary sample of 20 cases, which had 20% positive cases. The collected tonsil samples were inoculated in Rappaport broth, and Salmonella-Shigella and McConkey media. The biotyping identification process was based on biochemical and serological tests using O:3, O:8 and O:9 antisera. RESULTS: Twenty-two isolates were obtained. Most were biotype 1 (8 cases of O:3 and 8 cases of O:9), but 6 cases could not be serotyped. None of the isolates were of O:8 group. CONCLUSIONS: This was the first time that Y. enterocolitica serotypes were isolated from pig tonsils in Mexico. Its importance rely on the fact that the isolated serotypes are the most commonly found in public health problems.

OBJETIVO: Conocer la existencia de Yersinia enterocolitica en suínos visiblemente sanos y sacrificados para el consumo humano. MÉTODOS: Fueron estudiadas 100 muestras de tejido linfático obtenidas en el momento del sacrifício, en un matadero del Estado de México. Fueron realizados muestreos pilotos de 20 casos, de los cuales 20% fueron positivos, permitiendo obtener una muestra estudiada (n=100). Las muestras colectadas de tejido linfático fueron acondicionadas para el aislamiento de Yersinia enterocolitica en caldo de Rappaport y en medio de cultivo de Salmonella-Shigella y MacConkey. Las identificaciones fueron efectuadas por medio de pruebas bioquímicas y serológicas, utilizándose en el caso los antisueros O:3, O:8 y O:9 para la biotipificación correspondiente. RESULTADOS: Fueron obtenidos 22 aislamientos tipificándose 8 serotipos pertenecientes al O:3 y 8 al O:9 correspondientes al biotipo 1; y, en 6 muestras no fue posible la serotipificación. No se encontró en el total de los aislados el serotipo O:8. CONCLUSIONES: En base en la metodología, se registró la presencia de Y. enterocolitica y sus serogrupos en tejido linfático de porcinos por la primera vez en México; esto es importante porque el patógeno y sus serotipos aislados están comprometidos con mayor frecuencia con problemas de salud pública.